【摘 要】
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目的:运用网络药理学结合生物信息学探讨小柴胡汤治疗阿尔茨海默病（AD）的潜在作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）筛选小柴胡汤的可能活性化合物及其潜在治疗靶标,从基因表达综合数据库（GEO）中获取与AD相关的差异表达基因,取交集筛选出小柴胡汤可能的靶点;对交集靶点基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析;构建化合物—靶点网络、蛋白互作（PPI）网络,
【基金项目】
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成都中医药大学青年学者人才项目（QNXZ2019043）； 四川省科技厅国际合作与交流项目（2017HH0004）； 国家自然科学基金项目（81603537）； 四川省中医药管理局项目（2021MS464）； 四川省名中医工作室建设项目（川中医药办
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目的:运用网络药理学结合生物信息学探讨小柴胡汤治疗阿尔茨海默病（AD）的潜在作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）筛选小柴胡汤的可能活性化合物及其潜在治疗靶标,从基因表达综合数据库（GEO）中获取与AD相关的差异表达基因,取交集筛选出小柴胡汤可能的靶点;对交集靶点基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析;构建化合物—靶点网络、蛋白互作（PPI）网络,进行KEGG和GO富集分析。采用β淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）诱导PC12细胞制备AD细胞模型,以小柴胡汤干预处理后,细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞活率,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色观察细胞形态、细胞膜电位检测、流式细胞术检测细胞凋亡、细胞荧光免疫检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）/Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达,初步验证网络药理学预测结果。结果:小柴胡汤共收集到190个化学成分和41个AD相关靶点,包括丁子香萜,槲皮素,小檗碱,原卟啉,24-Ethylcholest-4-en-3-one,β-D-呋喃核糖苷等关键化合物及Sigma非阿片类细胞内受体1（SIGMAR1）,细胞周期检测点激酶1（CHEK1）,非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶6（PTPN6）,蛋白激酶C（PRKCH）,核转录因子κB激酶亚单位β抑制蛋白（IKBKB）,组织蛋白酶D（CTSD）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）,Bax,Bcl-2样蛋白1（Bcl-2L1）等核心靶点。GO富集分析获得302个条目（P<0.05）,主要与调控神经元细胞凋亡相关;KEGG通路富集获得相关通路73条（P<0.05）,涉及的主要通路和生物过程包括细胞凋亡通路、脂质和动脉粥样硬化相关通路、癌症相关通路等。细胞实验表明,与空白组比较,模型组细胞活率降低（P<0.05）,凋亡率升高（P<0.05）、线粒体膜电位降低,Bcl-2/Bax下调;与模型组比较,小柴胡汤组细胞活率升高（P<0.05）,细胞凋亡率降低（P<0.05）、线粒体膜电位升高,Bcl-2/Bax上调,验证了预测结果的可靠性。结论:本研究揭示了小柴胡汤治疗AD多成分、多靶点、多途径的作用特点,为进一步阐释其物质基础和机制奠定了一定基础。
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