【摘 要】
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本研究探讨多药耐药(mdrl)基因体外转染人骨髓间充质干细胞(BMMSC)以应用于基因治疗的可行性、安全性.体外分离、培养、鉴定MSE;采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载体(l
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本研究探讨多药耐药(mdrl)基因体外转染人骨髓间充质干细胞(BMMSC)以应用于基因治疗的可行性、安全性.体外分离、培养、鉴定MSE;采用具有高效转染非分裂期细胞的慢病毒载体(lentiviral vector,LV)系统将mdrl基因导入BMMSC中;采用RT-PCR和GFP荧光技术检测目的基因的表达,台盼蓝染色及MTT法检测转染后细胞的增殖能力.结果表明:慢病毒感染MSC的感染复数(multiplicity of infection,MOI)为10,最佳感染率可达80%;MSC表面低表达CD34、HLA-DR、CD31、CD45,高表达CD44、CD105、CD90、CD13;GFP荧光表达自72小时开始出现,以后逐渐增强;转染细胞中显示目的基因mRNA的表达;转染时MSC存活及增殖几乎无影响(P>0.05).结论:慢病毒载体可成功转染人骨髓间充质干细胞并使其mdrl表达增高,转染对MSC存活及增殖基本无影响.
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