【摘 要】
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目的探索CXCL12与VEGF在EPC增殖、迁移和血管生成等过程中是否存在协同作用。方法 (1)用密度梯度离心法分离脐带血获取EPC并鉴定。(2)体外增殖实验:不同组别的细胞因子处理之
【机 构】
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皖南医学院,复旦大学附属闵行区中心医院神经内科
【基金项目】
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国家自然科学基金(81572232)
论文部分内容阅读
目的探索CXCL12与VEGF在EPC增殖、迁移和血管生成等过程中是否存在协同作用。方法 (1)用密度梯度离心法分离脐带血获取EPC并鉴定。(2)体外增殖实验:不同组别的细胞因子处理之后(CXCL12:10 ng/mL,50ng/mL,100 ng/mL;VEGF:10 ng/mL,50 ng/mL,100 ng/mL;CXCL12联合VEGF3组浓度分别为:10 ng/mL CXCL12+10 ng/mL VEGF;50 ng/mL CXCL12+50 ng/mL VEGF; 100 ng/mL CXCL12+100 ng/mL VEGF)CCK8检测细胞OD值。(3)体外细胞迁移实验:Transwell系统中不同浓度CXCL12及VEGF处理EPC后固定,DAPI染色,统计比较各组迁移到下层的EPC数。(4)体外管腔形成实验:不同组细胞因子处理EPC后(10 ng/mL VEGF,10 ng/mL CXCL12+10ng/mL VEGF; 50 ng/mL CXCL12+10 ng/mL VEGF; 100 ng/mL CXCL12+10 ng/mL VEGF)在基质胶上孵育4 h后,观察EPC管腔样结构的形成情况。结果与CXCL12相比,VEGF浓度依赖性的促EPC增殖;CXCL12联合VEGF促增殖能力在50 ng/mL浓度时达到高峰,但没有超过单独使用VEGF组。在迁移与管腔实验中,CXCL12联合VEGF组更能促进EPC的迁移和管腔形成能力,且呈浓度依赖性。结论 CXCL12和VEGF在一定浓度范围内联合的效应大于单一的作用,且有最佳浓度比例,可能会为EPC的移植治疗提供更好的生存环境。
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