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根据已知大鼠次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(Hypoxanthine Guanine Phosphoribosyl Transferase,HPRT)基因的外显子序列,从大鼠HPRT基因组DNA序列的细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)中用酶切和PCR方法分别分离得到用于构建基因敲除载体的3.0kb的5′长臂(Long Arm,LA)和1.7kb的3′短臂(Short Arm,SA),并分别克隆到pSL1180和pCR2.1中。进一步构建大鼠HPRT基因打