【摘 要】
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为了建立鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,利用PCR扩增出AngHV ORF49的序列,克隆至pET-32a载体,构建重组质粒pET-32a-ORF49,作为qPCR的标准品;根据ORF49序列设计引物,以梯度稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠqPCR扩增,制作标准曲线,建立AngHV的qPCR检测方法,并评价其灵敏性、特异性、重复性和应用效果。结果显示,qPCR的阈值循环数(cycle t
【基金项目】
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国家自然科学基金(31101933),福建省公益类科研院所基本科研专项(2017R1019-5),福建省农业科学院项目(AC2017-1)。
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为了建立鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,利用PCR扩增出AngHV ORF49的序列,克隆至pET-32a载体,构建重组质粒pET-32a-ORF49,作为qPCR的标准品;根据ORF49序列设计引物,以梯度稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR GreenⅠqPCR扩增,制作标准曲线,建立AngHV的qPCR检测方法,并评价其灵敏性、特异性、重复性和应用效果。结果显示,qPCR的阈值循环数(cycle t
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