C3启动子克隆及荧光素酶报告基因载体构建

来源 :高师理科学刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dzxt720

【摘要】

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为克隆C3基因启动子序列,构建C3基因启动子荧光素酶报告基因载体,运用PCR的方法从血液中提取到的基因组DNA中获得目的基因,双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建C3基因

【作者】

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Salman Naseer Shahid Khan M Imran 何冰林佳

【机构】

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华北理工大学国际教育中心,河北唐山,063000华北理工大学生命科学学院,河北唐山,063000;

【出处】

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高师理科学刊

【发表日期】

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2016年11期

【关键词】

：

C3 启动子荧光素酶报告基因载体构建

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为克隆C3基因启动子序列,构建C3基因启动子荧光素酶报告基因载体,运用PCR的方法从血液中提取到的基因组DNA中获得目的基因,双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建C3基因启动子报告基因载体.构建的pGL3-Basic-C3-promotor重组质粒和内参质粒SV40瞬时转染Hela细胞,检测荧光素酶活性.结果表明,PCR扩增出C3基因启动子片段;双酶切及测序鉴定重组体构建正确;转染Hela细胞后经双荧光素酶报告基因检测确定重组体有启动子活性.成功构建了C3启动子报告基因载体,在细胞系中进行初步活性分析得知所克隆的C3基因调控序列包含启动子活性区域.

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