下呼吸道分泌物中糠秕马拉色菌的分离与鉴定

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目的

对痰涂片镜检可疑为马拉色菌的标本进行马拉色菌的分离培养,并对分离菌株进行系统鉴定。

方法

收集2010年3月至2011年9月卫生部北京医院经派克墨水染色镜检可疑为马拉色菌的下呼吸道分泌物标本133份,接种于含1%吐温60的科玛嘉琼脂培养基(即改良念珠菌显色培养基),于35 ℃大气环境中培养。挑取疑似菌落在含0.5%吐温40和0.5%吐温60的沙保弱平板上进行纯培养。采用传统的表型鉴定方法对分离菌株进行鉴定,包括染色镜检观察菌体形态及染色性、沙保弱培养基生长试验、吐温试验、七叶苷分解试验、过氧化氢试验、吐温沉淀试验和蓖麻油试验,可疑菌株采用18s rRNA基因序列分析方法对分离菌株进行菌种鉴定。

结果

镜检可疑的下呼吸道分泌物中马拉色菌分离率为47.4%(63/133),63株分离菌经传统的表型鉴定方法结合18s rRNA基因序列分析方法均鉴定为糠秕马拉色菌。标本直接涂片,用派克墨水染色镜下可明显区分马拉色菌和念珠菌。

结论

糠秕马拉色菌在改良念珠菌显色培养基上的菌落呈粉红色,可明显区别于其他念珠菌菌落,用改良念珠菌显色培养基可提高下呼吸道分泌物中糠秕马拉色菌的分离率。传统的表型鉴定结合基因序列分析可提高马拉色菌鉴定的准确性。(中华检验医学杂志,2012,35:711-715)

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