可溶性人干细胞因子的原核表达和纯化

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用Trizol提取人骨髓总RNA,通过RT PCR扩增人干细胞因子DNA,克隆到pMD18 T载体中并测序将其定向连入原核表达载体pET32a(+),获得了重组表达载体pET32a(+)/hSCF,其cDNA长度为504bp,测序结果与已知序列吻合然后在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达,获得37kD的融合蛋白,约占菌体总蛋白量的30% 经Ni2+ NTA树脂亲和层析柱纯化获得纯度大约90%的重组蛋白
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