大鼠体外肝星状细胞活化过程中代谢活化相关 CYP450亚型的变化

来源 :中国药理学与毒理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:colinwangaaaa
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目的:观察大鼠肝星状细胞(HSC)活化不同时期外源活化相关 CYP450亚型CYP1A1, CYP1B1,CYP1A2,CYP2B1/2和 CYP2E1 mRNA 表达水平的变化规律。方法分离大鼠 HSC,接种在无包被塑料培养瓶中作为 HSC 自氧化活化模型,免疫细胞化学法检测不同培养时间 HSC 活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。实时定量 RT-PCR 法测定 HSC 自氧化激活的不同时期多种外源物活化相关 CYP450亚型 mRNA 的表达变化。结果免疫细胞化学结果表明,在塑料培养瓶中培养1 d 的 HSC 并不表达α-SMA,但随着培养时间的延长,α-SMA 表达逐渐增强,培养11 d 的 HSC 处于完全活化状态,能表达典型肌丝条纹和较强α-SMA,说明培养1,2,5和11 d 的 HSC 分别处于未活化期、活化早期、中期和晚期。实时定量 RT-PCR 结果显示,在未活化的 HSC(培养1 d)中,有 CYP1A1, CYP1B1, CYP1A2, CYP2B1/2和 CYP2E1的 mRNA 表达;在 HSC 活化早期(培养2 d),CYP1B1,CYP2B1/2,CYP2E1 mRNA 表达最高,分别为未活化 HSC 的2.1,1.6(P﹤0.05)和23.9(P﹤0.01)倍;而在活化中期(培养5 d)及晚期(培养11 d),这些 CYP 亚型表达显著降低甚至测不出。然而,CYP1A1和 CYP1A2在整个活化过程均持续下降。结论多种外源物活化相关 CYP450亚型在 HSC 自氧化激活过程发生了明显改变,其中CYP1B1,CYP2B1/2和 CYP2E1的 mRNA 表达在活化早期显著升高,这些变化可能与 HSC 的早期激活增殖有关。
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