大麻ISSR反应体系的优化与引物的初步筛选

来源 :中国农学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shuo19871108
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为探寻出更适宜大麻的ISSR反应体系,用以研究大麻的遗传多样性,利用梯度试验对dNTP、TaqDNA聚合酶和引物的浓度,预变性时间和退火温度5个因素进行优化,从而建立了适合大庥的ISSR-PCR反应体系。结果表明,在25pL体系中,dNTP200μmol/L,模板1ng/μL,引物200nmol/L,聚合酶1U(2.5pmol/μL);预变性3min(94℃),退火温度48%,为大麻最佳反应体系;研究利用优化后的ISSR反应体系,在30条引物中,筛选出8条适合大麻的ISSR引物,体系具有较好的稳定性和重复
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