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本文主要介绍上海交通大学分析测试中心配置的LeicaSP8STED3X激光扫描共聚焦显微镜的组成、技术参数和工作原理,它在LeicaTCSSP8共聚焦显微镜基础上搭载了超分辨模块、活细胞工作站和双光子模块,既可以开展纳米水平的亚细胞结构和动力学的研究,也可以观察活细胞中亚细胞器的运动特性及变化,是一个具备多种检测功能的超高分辨共聚焦显微系统。超高分辨率荧光显微技术主要包括基于调制照明光斑以缩小系统的点扩散函数的超分辨技术和基于单分子定位的超分辨技术。同时也简述了样品的制备方法和图像采集的参数设置原则,以及