【摘 要】
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针对ANXA2 mRNA序列设计4个靶点的小干扰RNA序列和一条阴性对照序列,构建表达这些序列的pU6H1-GFP重组质粒,导入Caco-2细胞,在不同时间点检测ANXA2 mRNA水平、蛋白水平、细胞
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针对ANXA2 mRNA序列设计4个靶点的小干扰RNA序列和一条阴性对照序列,构建表达这些序列的pU6H1-GFP重组质粒,导入Caco-2细胞,在不同时间点检测ANXA2 mRNA水平、蛋白水平、细胞增殖、凋亡及迁移能力的变化.研究了膜联蛋白A2(ANXA2)基因表达水平对人结直肠癌细胞系Caco-2增殖、凋亡以及迁移能力的影响.结果显示,所构建的4个重组质粒对Caco-2细胞ANXA2基因的表达均发挥了不同程度的干扰作用,其中以1号靶点的干扰效果最强,转染后72 h抑制率达70.0%,ANXA2蛋白水平显著下降,Caco-2细胞的增殖力和迁移能力受到显著抑制,凋亡细胞数量显著增加(P<0.01).ANXA2表达水平与人结直肠癌细胞的生长、增殖、凋亡及迁移能力密切相关,抑制ANXA2的表达可抑制Caco-2细胞的增殖和迁移能力,促进细胞凋亡,机理可能是ANXA2参与了细胞的DNA合成以及肌动蛋白的调控.
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