构建细菌内同源重组型hTERT调控区反义RNA腺病毒载体

来源 :中国现代普通外科进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:palerm97
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目的:构建细菌内同源重组型端粒酶催化亚单位调控区c-myc结合位点的反义RNA腺病毒重组体.方法:PCR扩增hTERT启动子调控区c-myc结合位点370bp的DNA片段,与腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV连接,以抗生素平板筛选连接阳性的克隆,PCR鉴定方向,构建反向插入的hTERT-c-myc反义RNA腺病毒穿梭载体pShuttle-ashmyc,将PmeⅠ线性化的pShuttle-ashmyc与包装质粒pAdEasy-1共转染受体菌BJ5183进行同源重组.用含有卡那霉素的LB平板筛选同源重组阳
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