靶向性DNA甲基化酶在毕赤酵母中的表达和鉴定

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目的:在毕赤酵母中表达融合Myc—His标签的靶向性甲基化酶B1—3a并进行鉴定。方法:以含有B1—3a基因的pcDNA4.0-myc/his质粒为模板,通过PCR扩增获得融合有myc/his标签序列的目的区段B1—3a基因,然后克隆入表达载体pPIC3-5k;电穿孔转化毕赤酵母菌株GS115,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS—PAGE和Western印迹对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中可见与目的蛋白相对分子质量(50000)相符的条带,该条带可被Myc标签单克隆抗体特异识别。结论:正确构
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