【摘 要】
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目的 本文作者比较了强毒株(RH)弓形虫与弱毒株(Prugniaud)基因组中一种可能成为基因标志物的基因片断--sag5b的差异.PCR扩增出的sag5b片断依次亚克隆进入T-easy载体以及pET2
【机 构】
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重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室,人畜共患病安徽省重点实验室
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目的 本文作者比较了强毒株(RH)弓形虫与弱毒株(Prugniaud)基因组中一种可能成为基因标志物的基因片断--sag5b的差异.PCR扩增出的sag5b片断依次亚克隆进入T-easy载体以及pET28a表达载体.融合基因经过IPTG诱导表达出目的蛋白,并通过SDS-PAGE和Western blotting 鉴定正确.证明表达出来的重组蛋白与强毒株弓形虫细胞膜上的天然蛋白有相同的免疫反应性.将感染了Prugniaud的小鼠脑组织取出并匀浆,以该脑组织为模板,分别用sag1和sag5b的引物来引发,结果发现sag1可以扩增出来而sag5b的扩增结果是阴性的.该结果提示sag5b可以作为鉴别弓形虫虫株毒力的基因标志.将该毒力相关基因的表达产物免疫小鼠并没有使小鼠获得明显的可以抵抗强毒株攻击的免疫保护性.
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