【摘 要】
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目的比较两种转染试剂Lipofectamine LTX&PLUS和罗氏X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent转染重组质粒至Caco-2细胞的转染效率。方法分别采用Lipofectamine LTX&PLUS转
【机 构】
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山西医科大学基础医学院实验教学中心形态学实验室
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目的比较两种转染试剂Lipofectamine LTX&PLUS和罗氏X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent转染重组质粒至Caco-2细胞的转染效率。方法分别采用Lipofectamine LTX&PLUS转染试剂与罗氏X-treme GENE HP转染试剂转染Caco-2细胞,以荧光素酶(Luc)和绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,利用荧光信号检测仪检测荧光信号,Lipofectamine LTX和质粒的比值分别为4∶1,3.5∶1,2∶1,罗氏X-HP与质粒的比值分别为3∶1,2∶1,1∶1,对转染试剂和质粒DNA之间的比值进行优化,然后比较两种转染试剂的转染效率;荧光倒置显微镜观察转染效果。结果对于Caco-2细胞,两种转染试剂均未影响细胞的正常形态,细胞毒性小。罗氏X-HP转染试剂与DNA质粒的比例是3∶1时转染效率较高(P<0.05),LTX转染试剂与DNA质粒的比例为3.5∶1时转染条件最佳(P<0.05)。比较两者的转染效率,罗氏转染试剂(Firefly RLU/Renilla RLU=0.667)高于LTX转染试剂(Firefly RLU/Renilla RLU=0.502)(P<0.05)。结论不同的转染试剂对相同细胞的转染效率不同。相比较而言,罗氏转染试剂对于Caco-2细胞的转染更为合适。
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