【摘 要】
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目的 建立快速诊断鼠脑心肌炎病毒感染的荧光定量RT-PCR方法.方法 根据鼠脑心肌炎病毒(EMV)PEC9毒株全基因组序列(GenBank登录号:DQ288856.1),设计一对特异性引物和TaqMan探
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241扬州大学兽医学院,扬州225009;扬州大学兽医学院,扬州,225009;上海实验动物研究中心,上海,201203;上海出入境检验检疫局,上海,20013
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目的 建立快速诊断鼠脑心肌炎病毒感染的荧光定量RT-PCR方法.方法 根据鼠脑心肌炎病毒(EMV)PEC9毒株全基因组序列(GenBank登录号:DQ288856.1),设计一对特异性引物和TaqMan探针,建立EMV的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性.结果 建立的荧光定量PCR方法,标准曲线的线性关系良好,r2值可达0.99,敏感性最低检测限为1个拷贝数,高于普通PCR方法1000倍,其特异性强,与其他常见感染的小鼠病毒株均无特异性扩增,批内和批间变异系数均小于2％.利用该方法对上海市120份小鼠心肌样品进行检测,未检测到阳性感染.结论 本研究为鼠脑心肌炎病毒感染的分子检测,为制定国家标准提供良好的方法.
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