人TRB3过表达载体的构建及检测

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目的:构建TRB3真核表达重组质粒,并用肝癌细胞MHCC-97H检测其表达。方法:从肝癌组织中提取并扩增TRB3基因的编码区,将其克隆到真核表达载体pcdh-CMV-MCS-GFP中,酶切并检定,将克隆成功的质粒转染至MHCC-97H细胞中,用q PCR和Western Blot检测TRB3的表达水平。结果与结论:成功扩增了TRB3的编码区,并克隆至真核表达载体中;转染后72、96 h,MHCC-97H细胞的TRB3 m RNA和蛋白表达显著增高;成功构建的TRB3过表达载体可用于后续实验。
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