论文部分内容阅读
目的
探讨Fasudil(法舒地尔)介导的细胞治疗对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)巨噬细胞的免疫调节作用。
方法雌性C57BL/6小鼠，采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)诱导建立主动免疫EAE模型，免疫后第9天制备脾脏单个核细胞(MNCs)，在添加/或无Fasudil条件下体外培养。 72 h后收集上述细胞，应用流式细胞术检测巨噬细胞亚群的变化，Griess法检测NO含量，ELISA法检测Arg-1水平；并以5×107个细胞/只小鼠腹腔注射诱导建立被动转移EAE模型，分为PBS-MNCs组和Fasudil-MNCs组，观察各组小鼠临床评分和体重变化。
结果主动免疫第9天EAE小鼠脾脏MNCs可诱导被动转移EAE模型的建立，而体外Fasudil处理72 h的MNCs可影响EAE的发生、发展。体外实验显示，Fasudil可部分逆转M1表型至M2表型，即M1型标志CD16/32、iNOS、IL-12降低，而M2型标志CD206、IL-10、CD23升高。Fasudil还可抑制NO产生，促进Arg-1分泌。
结论Fasudil通过转化炎性M1型巨噬细胞为抗炎的M2型巨噬细胞影响EAE的发生、发展。