【摘 要】
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目的 研究清热泻火经典方剂凉膈散(LGS)拮抗LPS所致小鼠巨噬细胞RAW 264.7损伤的作用机制.方法 采用MTr法评价LGS对RAW 264.7细胞的毒性.用LPS(1 mg·L-1)刺激RAW 264.7细胞产生炎症,并用ELISA法检测LGS对LPS诱导产生的炎症因子TNF-α、IL-6的影响.采用Western blot、免疫荧光、EMSA法检测LGS对LPS刺激RAW 264.7细胞
【机 构】
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南方医科大学中医药学院,广东广州510515
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目的 研究清热泻火经典方剂凉膈散(LGS)拮抗LPS所致小鼠巨噬细胞RAW 264.7损伤的作用机制.方法 采用MTr法评价LGS对RAW 264.7细胞的毒性.用LPS(1 mg·L-1)刺激RAW 264.7细胞产生炎症,并用ELISA法检测LGS对LPS诱导产生的炎症因子TNF-α、IL-6的影响.采用Western blot、免疫荧光、EMSA法检测LGS对LPS刺激RAW 264.7细胞所致NF-κBp65入核的影响.采用Western blot检测LGS对α7nAchR蛋白表达的影响以及α7 nAchR抑制(α7nAchR siRNA、α7nAchR抑制剂甲基牛扁碱)或激动(α7nAchR激活剂PUN282987)后,LGS对NF-κB相关蛋白表达的影响.结果 LGS在非毒剂量(25 ～400 mg·L-1)下就可明显抑制LPS诱导产生的炎症因子TNF-α和IL-6、IκB-α和NF-κB p65的磷酸化、NF-κB p65入核以及提高α7nAchR蛋白表达.并且α7 nAchR抑制或激动后,LGS对IκB-α、NF-κB p65磷酸化的抑制作用将减弱或增强.结论 LGS经乙酰胆碱抗炎通路关键蛋白α7 nAchR调控NF-κB相关蛋白表达,从而拮抗LPS诱导的炎症反应.
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ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
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