【摘 要】
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目的:利用基因工程技术获得有较高生物学活性的睫状神经营养因子(CNTF)蛋白.方法:应用反转录PCR技术直接扩增出人CNTF cDNA,克隆入pUC19载体中,用双脱氧法进行手工序列分析,
【机 构】
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吉林大学卫生部放射生物学重点实验室,北京空军总医院检验科
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目的:利用基因工程技术获得有较高生物学活性的睫状神经营养因子(CNTF)蛋白.方法:应用反转录PCR技术直接扩增出人CNTF cDNA,克隆入pUC19载体中,用双脱氧法进行手工序列分析,构建表达菌株pBV220-CNTF/DH5α.表达的蛋白质得到纯化,用鸡胚背根节无血清培养法检测表达蛋白生物学活性.结果:所克隆的CNTF基因序列与文献报道完全一致,pBV220-CNTF/DH5α能特异表达分子量大约为26 000的蛋白质,表达量约为菌体总蛋白量的35%.CNTF蛋白质经纯化后纯度约95%,而且表达蛋白
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