【摘 要】
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目的：构建携带HIV-1Vpr基因的重组腺病毒。方法：采用限制性内切酶消化和T4DNA连接酶连接的方法,将Vpr基因克隆至腺病毒穿梭质粒pTrack-C上,然后通过重组穿梭质粒pTrack-C-Vpr和
【机 构】
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天津医科大学一中心临床学院神经外科,南开大学医学院,卫生部危重病急救医学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（项目编号：30672158）
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目的：构建携带HIV-1Vpr基因的重组腺病毒。方法：采用限制性内切酶消化和T4DNA连接酶连接的方法,将Vpr基因克隆至腺病毒穿梭质粒pTrack-C上,然后通过重组穿梭质粒pTrack-C-Vpr和腺病毒骨架质粒pAdeno体外LR位点特异性重组的方法,将Vpr基因转移至腺病毒骨架质粒pAdeno上,最后重组骨架质粒pAdeno-Vpr鉴定正确后经PacI酶切,转染HEK293细胞,包装成重组腺病毒rAd5-Vpr。同时在HEK293细胞中进行病毒扩增,利用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,用微量全细胞
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