P物质融合毒素的质粒构建及其原核表达

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目的构建pET-CTR-PS重组原核表达质粒,原核表达Cholix Toxin的毒性部位和P物质的融合蛋白,为探讨该融合蛋白对肿瘤细胞的靶向杀伤作用奠定基础。方法 用PCR方法扩增Cholix Toxin的催化活性部分CTR,扩增后连入T载体构建T-CTR质粒。人工合成P物质双链寡核苷酸,将其插入pET32a中得到重组质粒pET-PS。将T-CTR和pET-PS分别经EcoRI和SacI双酶切后相接,构建得到重组质粒pET-CTR-PS。将测序正确的pET-CTR-PS重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3
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