MAGE-3基因稳定转染的HHCC细胞系的建立及其mRNA的表达

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caozhongxiang520
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目的: 构建肿瘤抗原MAGE-3基因的真核表达载体,建立MAGE-3基因稳定转染的人肝细胞癌细胞系(human hepatocellular carcinoma cell line,HHCC).方法: 利用分子生物学方法,构建带有MAGE-3基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的重组真核表达质粒pIRES2-EGFP-MAGE-3,经脂质体法转染HHCC后,用G418筛选阳性克隆.在荧光显微镜下观察HHCC中EGFP的表达,用RT-PCR法检测HHCC中MAGE-3 mRNA的表达.结果: 成功地构建了重组真核表达载体pIRES2-EGFP-MAGE-3.以其转染HHCC后,经荧光显微镜及RT-PCR分别检测到MAGE-3 mRNA转录和EGFP的表达.结论: 建立了1株可稳定转染MAGE-3基因的肝细胞癌HHCC,为进一步应用该基因进行肝癌的免疫治疗提供了实验依据.
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