论文部分内容阅读
目的观察下调整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)对宫颈癌细胞糖酵解及增殖、凋亡的影响,探讨其相关作用机制。方法选择宫颈癌细胞Ca Ski,细胞分3组,转染ILK siRNA、siRNA control分别为干扰组和阴性组,以未转染的细胞为对照组。qRT-PCR、Western blot检测细胞中ILK mRNA、蛋白表达水平。试剂盒检测细胞中丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)、己糖激酶(hexokinase,HK)、三磷腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平和培养液中乳酸水平,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved Caspase-9)、β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc蛋白水平。结果 ILK siRNA能够下调宫颈癌细胞中ILK mRNA和蛋白水平,siRNA control对细胞中ILK mRNA和蛋白水平没有影响。阴性组PK、HK、ATP、乳酸水平、细胞存活率、凋亡率、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9、β-catenin、c-myc表达水平与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,干扰组PK、HK、ATP、乳酸水平明显降低,细胞存活率明显降低,细胞凋亡率明显升高,细胞中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达水平升高,β-catenin、c-myc表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论下调ILK抑制宫颈癌细胞糖酵解和细胞增殖,促进细胞凋亡,作用机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。