【摘 要】
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目的 研究人血清中游离和总肉毒碱HPLC测定方法,建立成年体检人群血清中游离和总肉毒碱水平参考值.方法 血清样品经乙腈沉淀蛋白、衍生化反应后,以Lichrospher SiO2为固定相,乙腈-柠檬酸-三乙胺为流动相进行色谱等度分离,260 nm波长下定量检测,并对347名成年体检人群进行血清中游离和总肉毒碱水平测定.结果 在所建立的分析条件下,肉毒碱衍生化产物的色谱保留时间约为10 min,峰形清
【机 构】
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210002,南京军区南京总医院检验科,210002,南京军区南京总医院检验科,210002,南京军区南京总医院检验科,210002,南京军区南京总医院检验科
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目的 研究人血清中游离和总肉毒碱HPLC测定方法,建立成年体检人群血清中游离和总肉毒碱水平参考值.方法 血清样品经乙腈沉淀蛋白、衍生化反应后,以Lichrospher SiO2为固定相,乙腈-柠檬酸-三乙胺为流动相进行色谱等度分离,260 nm波长下定量检测,并对347名成年体检人群进行血清中游离和总肉毒碱水平测定.结果 在所建立的分析条件下,肉毒碱衍生化产物的色谱保留时间约为10 min,峰形清晰对称,与样品中其余内源性物质分离完全,定量准确.肉毒碱在0～400 μmol/L浓度范围线性良好.血清中游离肉毒碱和总肉毒碱批间(n=7)及平均批内(n=5)测定的相对标准偏差分别为3.04%、3.36%和1.77%、1.97%,测定平均回收率分别为98.2%和96.3%.对347名成年体检人群血清中肉毒碱水平测定结果显示:男182名总肉毒碱(52.2±8.6)μmol/L,游离肉毒碱(42.3±8.3)μmol/L,酯酰肉毒碱(9.9±2.9)μmol/L;女165名,总肉毒碱(48.2±9.9)μmol/L,游离肉毒碱(37.9±8.7)μmol/L,酯酰肉毒碱(10.3±3.5)μmol/L.统计学分析显示,男性血清中游离肉毒碱及总肉毒碱水平与女性组相比明显偏高,差异具有统计学意义(t=4.88、3.98,P<0.01).两组间酯酰肉毒碱浓度相比,差异无统计学意义(t=-1.32,P>0.05).结论 HPLC方法可同时检测血清游离和总肉毒碱含量,且灵敏度、特异性、重复性好,为有关肉毒碱在临床的合理应用及相关疾病的研究建立了有效的参考指标和检测方法。
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