【摘 要】
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目的:研究小鼠视网膜Müller细胞在深层血管发育中的作用.方法:实验用P0至P21的C57BL/6J小鼠,在视网膜切片上进行GS及GFAP免疫组织化学染色,研究Müller细胞的发育;在视网膜
【机 构】
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复旦大学上海医学院人体解剖与组织胚胎系
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目的:研究小鼠视网膜Müller细胞在深层血管发育中的作用.方法:实验用P0至P21的C57BL/6J小鼠,在视网膜切片上进行GS及GFAP免疫组织化学染色,研究Müller细胞的发育;在视网膜铺片进行ADP酶染色及GS与CD31免疫荧光双标激光共聚焦显微镜观察,研究视网膜血管发育及与M üller细胞的关系.选取P7小鼠建立高氧诱导的视网膜病变模型(OIR),分别在P9、P12、P14、P17、P21取眼球,在眼球切片上进行GFAP免疫组织化学染色;在视网膜铺片上进行ADP酶染色.在P14、P17、P21取OIR模型小鼠的视网膜,用Western-blot方法研究VEGF的表达变化.体外培养Müller细胞,用Western-blot方法研究低氧条件下VEGF的表达变化.结果:Müller细胞在P0时少量发育,P6～P8分化达到高峰,P10分化近晚期.视网膜血管生后发育,P8开始向深层出芽发育,P21基本成熟.在P8及P12视网膜,众多Müller细胞胞体紧紧包绕深层血管.OIR小鼠视网膜从P14开始出现新生血管,在P17～P21达到高峰;在P14～P21其VEGF表达呈上升趋势;Müller细胞从P14起内侧突起开始表达GFAP,到P21已遍布细胞全层.体外培养的Müller细胞在低氧情况下VEGF表达增加.结论:Müller细胞通过分泌VEGF促进视网膜深层血管的发育并对深层血管起到重要的结构支持作用.
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