【摘 要】
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目的:研究人肺表面活性物质相关蛋白A1(SP-A1)在甲醇酵母Pichia pastoris(P.pastoris)中的分泌表达、产物的分离纯化及免疫活性测定. 方法:将人SP-A1基因克隆至P.pastoris的
【机 构】
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第一军医大学珠江医院儿科,复旦大学遗传所
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目的:研究人肺表面活性物质相关蛋白A1(SP-A1)在甲醇酵母Pichia pastoris(P.pastoris)中的分泌表达、产物的分离纯化及免疫活性测定. 方法:将人SP-A1基因克隆至P.pastoris的分泌表达质粒pPIC9K上,获得重组表达质粒pPIC9K/SP-A,转化P.pastoris GS115、KM71.通过G418筛选获得高拷贝转化子(HIS4Mut+),在摇瓶中培养、甲醇诱导表达SP-A1,纯化目的蛋白,并免疫小鼠,ELISA 法和 western blotting分析SP-A
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