利用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠

来源 :中国比较医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ribb5619

【摘要】

：

目的应用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。方法针对miRNA-29b1基因设计一段sgRNA,sgRNA和Cas9体外转录后显微注射至C57BL/6小鼠受精卵细胞。小鼠出生后取其基因

【作者】

：

赵勇师长宏赵亚辛智倩刘佩娟张彩勤白冰白杰英王

【机构】

：

第四军医大学实验动物中心,军事医学科学院实验动物中心,安徽医科大学第一附属医院肿瘤科

【出处】

：

中国比较医学杂志

【发表日期】

：

2016年12期

【关键词】

：

CRISPR/Cas9 miRNA-29b1 基因敲除小鼠 CR1SPR/Cas9 miRNA-29bl Gene knockout mice

【基金项目】

：

国家自然科学基金优秀青年基金项目（NO.81522009）,国家自然科学基金面上项目（NO.8137257,81272385）, 军队重点项目（NO.BWS14J058）

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目的应用CRISPR/Cas9技术构建miRNA-29b1基因敲除小鼠。方法针对miRNA-29b1基因设计一段sgRNA,sgRNA和Cas9体外转录后显微注射至C57BL/6小鼠受精卵细胞。小鼠出生后取其基因组DNA进行测序以鉴定基因型,同时取小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器研磨后提取总RNA,通过real-time PCR分析miRNA-29b1在这些脏器中的表达。结果设计了20 bp的miRNA-29b1sgRNA并与Cas9一起进行了体外转录,显微注射小鼠受精卵细胞后获得miRNA-29b1基因突变

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