【摘 要】
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介绍了一种应用荧光显色的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)的检测方法。该方法使用了针
【基金项目】
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农业部重点项目(No.2008-G57)资助
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介绍了一种应用荧光显色的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)的检测方法。该方法使用了针对靶序列M+N基因的一组引物,并且能在63℃等温条件下30min内完成反应。在敏感性检测中RT-LAMP与RT-PCR都能检测103个包含靶基因片段的重组质粒。几种其它病原的核酸也被用来比较这两种方法的特异性,两种方法只能检测PRRSV。在荧光显色剂应用试验中,证实0.05mmol/L钙黄绿素以及0.6mmol/L锰离子可以用于LAMP扩增产物的判断,并且其判断结果与浊度判断结果一致。在对103个临床血液样本的检测中,RT-LAMP与RT-PCR检出的阳性样本数量分别是56个和48个。结果说明,应用荧光显色剂的RT-LAMP检测方法可以快速检测PRRSV。
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