论文部分内容阅读
目的 利用TaqMan荧光定量PCR方法，建立肠球菌实时荧光PCR检测方法，并初步应用于粪便中肠球菌的检测。方法 根据GenBank发表的肠球菌23SrRNA基因序列的保守区域参考国外文献设计合成特异性的引物和探针；利用构建的质粒标准品优化Mg^2＋的浓度和引物探针浓度，并考核检测体系的保守性、灵敏性和重复性；初步应用于粪便标本的检测分析。结果 Mg^2＋终浓度为4．5mmol／L，上下游引物终浓度为0．4μmol／L，灵敏度为6拷贝数／反应；绘制两种标准曲线，构建了基因拷贝数、细菌数为分析指标的定量分析