八肋游仆虫eRF3C端的76个氨基酸对于释放因子eRF1a的结合不是必需的

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【摘要】

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以八肋游仆虫第二类肽链释放因子eRF3基因为模板，用PCR的方法获得eRF3的C端（eRF3C）和C端缺失76个氨基酸的突变体eRF3Ct片段，并构建重组表达质粒pGEX．6p-1-eRF3C和pGEX-6p-1-eRF3Ct

【作者】

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宋莉王玉瑶柴宝峰王伟梁爱华

【机构】

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山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室

【出处】

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遗传学报

【发表日期】

：

2007年6期

【关键词】

：

八肋游仆虫肽链释放因子3 表达 Pull-down分析 Euplotes octocarinatus polypeptide release factor

【基金项目】

：

This work was supported by grants from National Natural Science Foundation of China （No. 30670282, 30470239, 3030038） and Natural Science Foundation of Shanxi Province （No. 2004 1079, 20051065）.

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以八肋游仆虫第二类肽链释放因子eRF3基因为模板，用PCR的方法获得eRF3的C端（eRF3C）和C端缺失76个氨基酸的突变体eRF3Ct片段，并构建重组表达质粒pGEX．6p-1-eRF3C和pGEX-6p-1-eRF3Ct，转入大肠杆菌BL21（DE3）中获得了可溶性表达。通过Glutathione Sepharose 4B柱亲和层析纯化，重组蛋白GST-eRF3C和GST-eRF3Ct获得纯化。Western blotting分析表明获得的蛋白为目的蛋白。PreScission酶切割后得到eRF3C

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