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目的构建花背蟾蜍（Bufo raddei Strauch）转录因子Pax6variant的原核表达载体，纯化融合蛋白His—Pax6variant并以其为抗原免疫家兔，制备花背蟾蜍转录因子Pax6variant多克隆抗体。方法RT—PCR扩增得到花背蟾蜍胚胎组织的Pax6variant基因，并将此片段与原核表达载体pET-28a—c连接，构建重组表达质粒pET—Pax6 variant并转化大肠杆菌Rosetta（DE3）菌株，诱导融合蛋白His—Pax6 variant表达；所获得的可溶性蛋白经亲和层析