【摘 要】
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目的:制备含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因、胸苷激酶(TK)基因的融合基因重组腺病毒,为恶性肿瘤的基因治疗研究作准备.方法:构建含有CD、TK融合基因的重组粘粒,将其与腺病毒DNA末端肽
【机 构】
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第二军医大学东方肝胆医院胆道二科,长海医院普通外科,长海医院胸心外科
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目的:制备含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因、胸苷激酶(TK)基因的融合基因重组腺病毒,为恶性肿瘤的基因治疗研究作准备.方法:构建含有CD、TK融合基因的重组粘粒,将其与腺病毒DNA末端肽复合物混合后以磷酸钙共沉淀法转染人胚肾293细胞株细胞,获取重组腺病毒,并进行鉴定.结果:酶切结果及PCR结果显示,重组粘粒中CD、TK融合基因插入正确,经鉴定所获重组腺病毒带有融合基因,并且无具有复制能力的腺病毒存在.结论:所获重组腺病毒为E1、E3缺陷型,含有所需的双自杀基因,可进一步用于基因治疗研究.
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