【摘 要】
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目的 探讨基质细胞OP9能否影响ph+急性淋巴细胞白血病细胞株Sup-B15细胞对伊马替尼的敏感性以及作用机制.方法 实验分为Sup-B15细胞组及基质细胞OP9与Sup-B15共培养组(即Sup-
【机 构】
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221000,徐州医学院附属医院血液科
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目的 探讨基质细胞OP9能否影响ph+急性淋巴细胞白血病细胞株Sup-B15细胞对伊马替尼的敏感性以及作用机制.方法 实验分为Sup-B15细胞组及基质细胞OP9与Sup-B15共培养组(即Sup-B15/OP9组).采用CCK-8法测定细胞增殖抑制率;流式细胞术检测Annexin V/7-AAD标记的细胞凋亡率、CD34+CD38-细胞比例;荧光定量PCR检测细胞ALDH1、CD144、β-catenin mRNA水平;Western blot法检测细胞CD133、CD144、β-catenin蛋白表达水平;免疫共沉淀方法检测结合于CD144的β-catenin水平.结果 10～45 μmol/L伊马替尼对Sup-B15、Sup-B15/OP9细胞均有增殖抑制作用,其IC50值分别为26.3和35.8 μmol/L,两组差异有统计学意义(P＜0.05).30 μmol/L伊马替尼作用于Sup-B15、Sup-B15/OP9细胞24h,细胞总凋亡率分别为(14.24±2.11)％和(3.45±0.68)％,两组差异有统计学意义(P＜0.05).与Sup-B15组相比,Sup-B15/OP9组CD34+CD38-细胞比例增高[(3.42±0.28)％对(2.16±0.15)％,P＜0.05],ALDH1 mRNA水平增高(0.097±0.012对0.046±0.010,P＜0.05),CD133蛋白表达水平升高;CD144 mRNA水平增高(0.103±0.015对0.010±0.003,P＜0.05),CD144蛋白表达水平亦明显增高;β-catenin mRNA水平无明显变化(P＞0.05),其蛋白总量明显上升,转位到细胞核的β-catenin蛋白明显增加,结合于CD144的β-catenin蛋白增加.结论 与OP9细胞共培养后,Sup-B15细胞对伊马替尼敏感性下降,该作用可能与上调CD144表达、稳定CD144/β-catenin信号通路、增加β-catenin核转位有关.
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