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【摘要】：采用热水浸提法提取重楼多糖，用硫酸-蒽酮显色法进行含量测定。设计正交试验，探讨了固液比、提取温度和提取时间对重楼多糖得率的影响及最佳提取工艺。结果表明：影响重楼多糖得率的最显著因素是提取时间，最优提取条件是固液比1：30、提取温度60 ℃、提取时间2.5 h。在此条件下，重楼多糖得率为13.91%。
【关键词】：重楼多糖 提取工艺 正交试验 多糖得率
重楼，又名“蚤休”，属华中珍稀濒危植物【1】，广泛分布于云南、四川等地，以蚤休之名始载于《神农本草经》【2】，味苦、微寒，具清热解毒、消肿止痛功效，民间多用于治疗毒蛇咬伤、流行性腮腺炎，也用于惊风抽搐。其主要化学成分有甾体皂苷、黄酮以及多糖，其中多糖具有降血压、抗氧化及免疫调节等活性，因此日益成为中药材评价指标之一。前期研究表明重楼多糖具有较好的体外活性，对其提取工艺的研究报道较少，故本实验通过热水浸提法提取重楼多糖，设计正交实验优化提取工艺，优选最佳提取条件，为重楼多糖在医药及保健领域的开发应用提供科学依据。
1仪器、试剂与材料
1.1 仪器
小型高速粉碎機WK-2000A （青州市精诚医药装备制造有限公司） SHB-ⅢS循环水式多用真空泵 （郑州长城科工贸有限公司） 酶标仪 （美国Bio-TeK公司） 离心机SIGMA4K15
1.2 试剂与材料
重楼（安国药源商贸有限公司） 葡聚糖标准品 （色谱纯， 美国Sigma-Aldrich公司）
所用试剂均为分析纯，水为去离子水 三氯甲烷、正丁醇、无水乙醇
2方法与结果
2.1 标准曲线的绘制
采用改良蒽酮硫酸法， 以葡萄糖为标准品， 浓度为横坐标， 吸光值为纵坐标， 绘制标准曲线， 得线性回归方程：Y=3.6927X-0.0067，R2=0.9987。
2.2 单因素考察
称取5份重楼粉末2g，分别按固液比1：20、1：30、1：40、1：50、1：60加入纯水，70℃提取2h，提取液补足减失重量，离心、抽滤，稀释至适当浓度用改良蒽酮硫酸法630nm测吸光度，结果提取率先增大后减小，1：30最大。
称取5份重楼粉末2g，加80mL纯水，分别40、50、60、70、80℃提取2h，同法测吸光度，结果提取率先增大后减小，60℃最大。
称取5份重楼粉末2g，加80mL纯水，70℃分别提取1、1.5、2、2.5、3h，同法测吸光度，结果提取率先增大后减小，2.5h最大。
3 正交试验
结合单因素试验结果，设计三因素三水平正交试验，分别进行9组实验。结合方差分析，对多糖得率影响最大的是提取时间，最佳提取条件为，固液比1：30、提取温度60℃、提取时间2.5h，此条件下多糖得率为13.91%。
4 结论
通过单因素分析，设计正交试验，提取时间对多糖得率影响最大，PC<0.01，因素C具有极显著性差异。通过本文研究发现：重楼多糖的最佳提取条件是，固液比1：30、提取温度60℃、提取时间2.5h。在此条件下，重楼多糖得率为13.91%。该研究结果提高了重楼多糖的提取效率，优化了提取工艺，为重楼多糖的开发利用提供科学依据。
【参考文献】：
【1】叶漪，梁娟.七叶一枝花的研究与开发利用[J].中国野生植物资源，2018，37（02）：73-75，78.
【2】关书博，李可强，张振秋.重楼中薯蓣皂苷元两种提取方法比较研究[J].辽宁中医药大学学报，2017，19（11）：60-62.
【关键词】：重楼多糖 提取工艺 正交试验 多糖得率
重楼，又名“蚤休”，属华中珍稀濒危植物【1】，广泛分布于云南、四川等地，以蚤休之名始载于《神农本草经》【2】，味苦、微寒，具清热解毒、消肿止痛功效，民间多用于治疗毒蛇咬伤、流行性腮腺炎，也用于惊风抽搐。其主要化学成分有甾体皂苷、黄酮以及多糖，其中多糖具有降血压、抗氧化及免疫调节等活性，因此日益成为中药材评价指标之一。前期研究表明重楼多糖具有较好的体外活性，对其提取工艺的研究报道较少，故本实验通过热水浸提法提取重楼多糖，设计正交实验优化提取工艺，优选最佳提取条件，为重楼多糖在医药及保健领域的开发应用提供科学依据。
1仪器、试剂与材料
1.1 仪器
小型高速粉碎機WK-2000A （青州市精诚医药装备制造有限公司） SHB-ⅢS循环水式多用真空泵 （郑州长城科工贸有限公司） 酶标仪 （美国Bio-TeK公司） 离心机SIGMA4K15
1.2 试剂与材料
重楼（安国药源商贸有限公司） 葡聚糖标准品 （色谱纯， 美国Sigma-Aldrich公司）
所用试剂均为分析纯，水为去离子水 三氯甲烷、正丁醇、无水乙醇
2方法与结果
2.1 标准曲线的绘制
采用改良蒽酮硫酸法， 以葡萄糖为标准品， 浓度为横坐标， 吸光值为纵坐标， 绘制标准曲线， 得线性回归方程：Y=3.6927X-0.0067，R2=0.9987。
2.2 单因素考察
称取5份重楼粉末2g，分别按固液比1：20、1：30、1：40、1：50、1：60加入纯水，70℃提取2h，提取液补足减失重量，离心、抽滤，稀释至适当浓度用改良蒽酮硫酸法630nm测吸光度，结果提取率先增大后减小，1：30最大。
称取5份重楼粉末2g，加80mL纯水，分别40、50、60、70、80℃提取2h，同法测吸光度，结果提取率先增大后减小，60℃最大。
称取5份重楼粉末2g，加80mL纯水，70℃分别提取1、1.5、2、2.5、3h，同法测吸光度，结果提取率先增大后减小，2.5h最大。
3 正交试验
结合单因素试验结果，设计三因素三水平正交试验，分别进行9组实验。结合方差分析，对多糖得率影响最大的是提取时间，最佳提取条件为，固液比1：30、提取温度60℃、提取时间2.5h，此条件下多糖得率为13.91%。
4 结论
通过单因素分析，设计正交试验，提取时间对多糖得率影响最大，PC<0.01，因素C具有极显著性差异。通过本文研究发现：重楼多糖的最佳提取条件是，固液比1：30、提取温度60℃、提取时间2.5h。在此条件下，重楼多糖得率为13.91%。该研究结果提高了重楼多糖的提取效率，优化了提取工艺，为重楼多糖的开发利用提供科学依据。
【参考文献】：
【1】叶漪，梁娟.七叶一枝花的研究与开发利用[J].中国野生植物资源，2018，37（02）：73-75，78.
【2】关书博，李可强，张振秋.重楼中薯蓣皂苷元两种提取方法比较研究[J].辽宁中医药大学学报，2017，19（11）：60-62.