流产衣原体荧光定量PCR方法的建立及小鼠感染菌体载量测定

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:leafxzc
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目的 建立荧光定量PCR(qPCR)对流产衣原体的检测方法。在流产衣原体灭活疫苗的生产中,代替具有主观判断影响的涂片染色疫苗效价检测方法。方法 根据流产衣原体富含半胱氨酸的胞质蛋白(envB)基因保守序列设计特异性引物,利用EnvB-PMD19T阳性质粒为参考标准品,优化了反应条件,进行了敏感性、特异性及重复性试验,检测了感染流产衣原体小鼠的菌体载量。结果 以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1×10 2 copies/μL~1×10 6 copies/μL内呈现良好的线性关系,扩增效率
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