【摘 要】
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【目的】旨在构建UGT72B14-2的原核表达体系,为进一步研究其功能与应用奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术从高山红景天茎叶中分离获取UGT72B14-2基因,在大肠杆菌中表达后,经N
【机 构】
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北京农学院植物科学技术学院,农业部都市农业（北方）重点实验室
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【目的】旨在构建UGT72B14-2的原核表达体系,为进一步研究其功能与应用奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术从高山红景天茎叶中分离获取UGT72B14-2基因,在大肠杆菌中表达后,经Ni 2+亲和柱纯化、PD-10柱脱盐处理,利用SDS-PAGE检测目标蛋白。【结果】测序结果表明UGT72B14-2基因长度为1 422bp,预测其编码473个氨基酸,蛋白质相对分子量(Mr)为51.49kDa,等电点(pI)为6.30;SDS-PAGE检测结果表明当初始菌液OD600约0.6时,诱导4h后目标蛋白即可大量表达,纯化、脱盐和浓缩处理后可获得较高纯度的重组蛋白。【结论】UGT72B14-2属于UDP-葡萄糖基转移酶家族的一员,能够在大肠杆菌中表达。
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