牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒和牛肠道病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lioutao2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
根椐GenBank中已发表中病毒性腹泻病毒(BVDV)、中冠状病毒(BCoV)和中肠道病毒(BEV)基因的保守序列,设计合成引物,在建立单一病毒RT-PCR检测方法的基础上,继续优化条件,建立上述3种病毒的多重RT-PCR检测方法,并应用建立的检测方法对临床样本进行检测,计算符合率。结果表明,引物浓度分别为BVDV 0.5μL(20μmol/L),BCoV 0.25μL(20μmol/L),BEV 0.25μL(20μmol/L),退火温度为52℃时,可同时扩增BVDV的289bp,BCoV的458bp和BEV的732bp的特异性片段,对牛流行热病毒(BEFV)、牛轮状病毒(BRV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)均无扩增。该方法最低能检出6.4pg的BVDV,1.28pg的BCoV和6.4pg的BEV的等量混合质粒模板。对24份临床腹泻病料进行检测,与单项RT-PCR检测的符合率为100.0%。本研究建立的多重RT-PCR检测方法,具有准确、快速、特异的特点,可用于临床混合感染的同时检测。
其他文献
<正>2015年12月18日—20日,由《文学遗产》编辑部与华东师范大学中文系共同主办的中国古代小说戏曲研讨会在上海举行。参加本次会议的代表近70人,以中青年学者为主,并特邀黄
<正> 式中X为H或烷基。这类化合物也可以看作是哌啶的衍生物,所以亦称为受阻哌啶。受阻胺和紫外线吸收剂不同。紫外线吸收剂本身会吸收使聚合物光老化的长波紫外线而达到防止
三代压水堆作为我国新建核电的主力堆型,其经济性及市场竞争力受到行业内外广泛关注。我们通过分析核电成本组成、核电技术经济特点、现行核电电价政策以及核电所面临的新的市
报纸
通用土壤流失方程USLE是美国研制的用于定量预报农地或草地坡面多年平均年土壤流失量的一个经验性土壤侵蚀预报模型。由威斯启梅尔(W.H.Wischmier)结合美国20世纪30年代起的8
利用RT-PCR和RACE技术从飞机草中克隆得到1628 bp的类黄酮3’-羟化酶cDNA的全长序列,命名为CoF3’H, GenBank登录号为HQ268505.1。CoF3’H基因的编码区长度为1524 bp,编码507
山东兖矿鲁南化肥厂于2008年新建1套240kt/a合成氨系统,气体净化变换系统第1中变废热锅炉、第2中变废热锅炉、低变废热锅炉、低压废热锅炉于2006年6月制造。设备安装后,在系统进
中国的风险投资事业蓬勃发展,而相关的法律制度也有待进一步完善。因此,了解国外风险投资涉及的有关法律文书条文,既有利于保护部分涉外风险投资项目参与者的利益,又有利于加
切向磁钢混合励磁双凸极电机取消了传统混合励磁双凸极电机的轴向磁路和附加气隙,结构优化设计更为方便.为深入研究该电机,本文首先阐述该电机的结构特点,并建立Ansoft Maxwe
一、前言我国渔网材料自60年代初期逐步试用合成纤维材料以来,经过20多年的推广应用,基本上代替了原来的棉麻材料,从目前国内外使用的渔网材料来看,品种分有聚酰胺(PA)、聚酯