水稻蛋白二硫键异构酶基因沉默载体构建及其转基因后代的高温结实特性分析

来源 :作物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：terrychang2009

【摘要】

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采用RT-PCR法亚克隆了PD，基因保守区内450bp的靶标序列作为干扰区段，构建了含有内含子hpRNA（ihpRNA）的双元表达载体pTCK303-RiOsPDI，经农杆菌介导转化日本晴，获得转基因植株；通过在R

【作者】

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刘光快曹珍珍韦克苏潘刚苏达张春娇程方民

【机构】

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浙江大学农业与生物技术学院

【出处】

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作物学报

【发表日期】

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2013年5期

【关键词】

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水稻蛋白二硫键异构酶基因沉默 RNAI载体构建高温胁迫结实特性 Rice （Oryza sativa L.） Protein disulfide is

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采用RT-PCR法亚克隆了PD，基因保守区内450bp的靶标序列作为干扰区段，构建了含有内含子hpRNA（ihpRNA）的双元表达载体pTCK303-RiOsPDI，经农杆菌介导转化日本晴，获得转基因植株；通过在R代对其潮霉素（Hyg）抗性基因的PCR鉴定，确定携带有干扰片段的T-DNA区已整合到水稻基因组中，且在转基因T1代符合3：1的分离模式。半定量PCR和荧光定量PCR的检测结果表明，PDI基因沉默转基因阳性植株不同器官中的PD，表达量均显著降低，尤其是其籽粒中表达量较微，几乎能引起靶基因80％左右

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