【摘 要】
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目的建立腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)抑制剂的快速筛选模型。方法采用ADA酶,以腺苷为底物,2’-脱氧助间型霉素作为抑制剂验证反应体系,通过紫外分光光度法检测,优化
【机 构】
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兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省中藏药筛选与深加工重点实验室,青海省西宁市药检所,
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目的建立腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)抑制剂的快速筛选模型。方法采用ADA酶,以腺苷为底物,2’-脱氧助间型霉素作为抑制剂验证反应体系,通过紫外分光光度法检测,优化反应条件,并对248种中药提取物及其内生菌发酵产物进行筛选。结果建立了最佳模型方案为:p H 7.5的PBS缓冲液体系,底物浓度为腺苷200μg·m L?1,ADA酶浓度55 IU·m L?1,连续检测腺苷在265 nm下OD值动态变化情况。此模型可以用于ADA酶抑制剂的快速筛选,且基于此模型共筛选获得23个有一定活性的粗提物。结论本实验建立的体系可以为ADA酶抑制剂的筛选提供简单易行、稳定、可靠的研究平台。
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