东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库的构建

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dragonlztf
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本项研究的目的是构建东方田鼠肝脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因奠定基础。用TRlzol试剂提取东方田鼠肝脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上EcoR I/Hind Ⅲ定向接头并用EcoR I和Hind Ⅲ酶切,使其两端分别带EcoR I和Hind Ⅲ粘性末端。用Mini Column纯化、收集300bp以上的双链cDNA片段,再连接于带有EcoR I和Hind Ⅲ末端的T7 Select 10.3b载体,经体外包装后,以BLT54
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