【摘 要】
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目的:探讨由大肠埃希菌(E.coliASI.357)和欧文菌(Erwinia carotovora)制备的左旋门冬酰胺酶的鉴别方法,以及效价测定的最适酶促反应条件。方法:采用高效液相色谱法及等电聚焦
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目的:探讨由大肠埃希菌(E.coliASI.357)和欧文菌(Erwinia carotovora)制备的左旋门冬酰胺酶的鉴别方法,以及效价测定的最适酶促反应条件。方法:采用高效液相色谱法及等电聚焦电泳法对2种菌株来源的左旋门冬酰胺酶进行鉴别;考察缓冲液的种类及pH值对左旋门冬酰胺酶效价测定的酶促反应的影响。结果:大肠埃希菌和欧文菌2种来源的左旋门冬酰胺酶的色谱图有差别,主峰保留时间分别为11.0、11.8min,等电点色带分别为4.65～5.1、7.1～8.20;效价测定的最适酶促反应条件分别是三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(pH=9.0)、0.2mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH=8.0)。结论:2种菌株来源的左旋门冬酰胺酶的等电点有显著差别,效价测定的最适酶促反应条件亦不相同,应作为2个品种制定质量标准。
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