【摘 要】
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目的 探究CK1α表达与糖尿病心肌病细胞自噬、脂质堆积、细胞凋亡的关系.方法 构建新生心肌细胞(NCM)脂毒性模型以及2型糖尿病雄性db/db小鼠模型分别进行体外研究以及体内研究,体外研究中将心肌细胞脂毒性模型分为腺病毒介导CK1α基因高表达组、阴性对照组、CRISPR/Cas9介导CK1α基因敲除组,体内研究的20只2型糖尿病雄性db/db小鼠模型分为CK1α过表达db/db组、注射对照组,并选取10只C57BL/Ks正常小鼠纳入正常小鼠组,对比各组的细胞自噬、脂质堆积、细胞凋亡指标差异.结果 ⑴Bec
【机 构】
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九江学院附属医院心血管内科,九江 332000
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目的 探究CK1α表达与糖尿病心肌病细胞自噬、脂质堆积、细胞凋亡的关系.方法 构建新生心肌细胞(NCM)脂毒性模型以及2型糖尿病雄性db/db小鼠模型分别进行体外研究以及体内研究,体外研究中将心肌细胞脂毒性模型分为腺病毒介导CK1α基因高表达组、阴性对照组、CRISPR/Cas9介导CK1α基因敲除组,体内研究的20只2型糖尿病雄性db/db小鼠模型分为CK1α过表达db/db组、注射对照组,并选取10只C57BL/Ks正常小鼠纳入正常小鼠组,对比各组的细胞自噬、脂质堆积、细胞凋亡指标差异.结果 ⑴Beclin-1蛋白主要在胞浆及细胞核中分布,阴性对照组的CK1α、Beclin-1蛋白、mRNA比3MA组高(P<0.05);⑵腺病毒介导CK1α基因高表达组的CK1α、Beclin-1蛋白、mRNA、Beclin-1蛋白绿色荧光强度最高,其次是阴性对照组、CRISPR/Cas9介导CK1α基因敲除组(P<0.05);⑶腺病毒介导CK1α基因高表达组的脂滴数量、二酰甘油及神经酰胺含量、细胞凋亡水平最低,其次是阴性对照组、CRISPR/Cas9介导CK1α基因敲除组(P<0.05);⑷CK1α过表达db/db组的LVIDd、LVIDs最低,FS、EF％水平更高,其次是正常小鼠组、注射对照组(P<0.05);⑸CK1α过表达db/db组具有最低的脂滴数量、二酰甘油及神经酰胺含量、细胞凋亡水平,其次是正常小鼠组、注射对照组(P<0.05);⑹CK1α过表达db/db组中CK1α、Beclin-1蛋白、mRNA表达水平最高,其次是正常小鼠组、注射对照组(P<0.05).结论 CK1α表达高表达会增强细胞自噬,CK1α表达可通过增强自噬能力途径改善糖尿病心肌病的脂质沉积、抑制细胞凋亡以及改善心功能的作用,可将CK1α与细胞自噬作为后续糖尿病心肌病治疗的新方向.
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