【摘 要】
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【目的】制备针对奶山羊DDX3Y蛋白的特异性多克隆抗体,为奶山羊H-Y抗原蛋白DDX3Y的功能研究奠定基础。【方法】以奶山羊睾丸组织提取的RNA反转录所得的cDNA为模板,采用PCR方
【出 处】
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西北农林科技大学学报(自然科学版)
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31672398);国家重点研发计划项目(2018YFD0501905)
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【目的】制备针对奶山羊DDX3Y蛋白的特异性多克隆抗体,为奶山羊H-Y抗原蛋白DDX3Y的功能研究奠定基础。【方法】以奶山羊睾丸组织提取的RNA反转录所得的cDNA为模板,采用PCR方法扩增得到奶山羊DDX3Y基因CDs区全序列,测序后通过生物信息学方法比对分析确定DDX3Y蛋白N端1-120氨基酸及C端570-660氨基酸为抗原片段,然后用PCR分别克隆这2个片段的基因,最后利用搭桥PCR方法得到奶山羊DDX3Y截短抗原基因序列。将DDX3Y截短抗原基因序列连接pET32a(+)质粒,构建pET32a(
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