农杆菌介导的DREB1A基因转化多花黑麦草及其转化体系的优化

来源 :山东大学学报(理学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyifan_18
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采用携带卡那霉素抗性基因nptⅡ和GUS基因的ubiquitin启动子驱动的表达载体pB1121/DREB1A的根癌农杆菌AGL1,对多花黑麦草幼胚来源的胚性愈伤组织进行了遗传转化,并优化了各种影响因素。胚性愈伤组织经根癌农杆菌感染和共培养后,用50mg/L巴龙霉素筛选抗性愈伤组织,待抗性愈伤组织在IB分化培养基上分化成苗后用25mg/L卡那霉素进一步筛选再生植株,获得了部分抗性植株。抗性植株的总DNA用DREB1A基因的特异引物进行PCR检测,转化频率为2.14%,PCR-Southem blot进一步
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