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以早熟禾基因组DNA为模板，利用正交设计，对影响ISSR反应体系的主要因素（Mg^2＋、dNTP、Taq酶）从4个水平上进行筛选和优化，建立了适合早熟禾的最佳ISSR反应体系：25ul反应体系中1．25UTaq酶、1．5mmol／LMg^2＋，10×PCR Buffer 2．5ul、0．4mmol／LdNTP、1ul引物、1ul DNA模板。扩增程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，56．4℃退火30s，72℃延伸1min，循环35次；72℃延伸7min，4℃保存。在此反应体系下，可以