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目的:制备抑制肿瘤细胞侵袭转移的单链抗体片段,用于构建小型化的免疫偶联物。方法:应用噬菌体呈现技术,以产生抗Ⅳ型胶原酶单抗的杂交瘤细胞为基础克隆构建单链抗体( scFv)基因。以表达质粒 pET-30a(+ )为载体在大肠杆菌中进行诱导表达。 ELISA法测定表达产物的免疫反应性,明胶酶谱法测定表达产物对靶酶活性的影响。 Boyden Chamber测定表达产物对肿瘤细胞侵袭的影响。结果:表达的单链抗体以包涵体形式存在,经变性和复性后,检测表明表达产物保留了对抗原的免疫反应性,对高转移性人肺癌 PG细胞分