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对重组巨大芽孢杆菌产胞外青霉素G酰化酶的发酵条件进行优化。先用单因素实验确定最适碳源、氮源以及碳源浓度、氮源浓度、发酵时间和发酵温度的范围。采用Box-Behnken实验设计和响应面分析方法，对重组巨大芽孢杆菌产青霉素G酰化酶的发酵条件进行优化，得出其最佳发酵条件为：葡萄糖32g／L、胰蛋白胨17g／L、时间42．5h、温度34℃，在此条件下青霉素G酰化酶的活力达到10614±8U／L，较优化前提高了16．83％。