【摘 要】
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4-羟基异亮氨酸具有葡萄糖浓度依赖的促进胰岛素分泌的活性,是治疗糖尿病的潜在新药。异亮氨酸羟化酶（isoleucine dioxygenase,IDO,由ido编码）能够特异性催化L-异亮氨酸合成4-
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31300069,31770053);中国博士后科学基金项目(2017M611170,2018T110662);天津市科技计划项目(17YFZCSY01050);天津科技大学青年教师创新基金项目(2016LG07)
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4-羟基异亮氨酸具有葡萄糖浓度依赖的促进胰岛素分泌的活性,是治疗糖尿病的潜在新药。异亮氨酸羟化酶（isoleucine dioxygenase,IDO,由ido编码）能够特异性催化L-异亮氨酸合成4-羟基异亮氨酸。为考察组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响,构建了ido组成型表达质粒pXM01-ido及菌株HIL017,其ido转录量及IDO活性较诱导型过表达菌株HIL016显著提升,4-羟基异亮氨酸产量较HIL016提高19.4%。为进一步提高4-羟基异亮氨酸产量,通过Plackett-Burman试验确定了HIL017发酵培养基中玉米浆、谷氨酸和FeSO4·7H2O为主要影响因素,利用最陡爬坡试验和响应面法确定其最优添加浓度为玉米浆34.10 g/L、谷氨酸2.98 g/L、FeSO4·7H2O 0.0167 g/L,此时4-羟基异亮氨酸理论产量为5.57 g/L。验证实验结果表明,最佳条件下4-羟基异亮氨酸产量为5.53 g/L,较优化前提高19.7%。
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